如何選擇嵌入皿小室產(chǎn)品的孔徑？

首先需要明確您所進(jìn)行的應(yīng)用是否需要細(xì)胞穿過小室膜上的孔。一般來說，共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、Caco-2 Transport實(shí)驗(yàn)及構(gòu)建細(xì)胞極化模型等不需要細(xì)胞穿膜，大多選擇0.4μm或1.0μm等小孔徑的產(chǎn)品。而在細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞則需要穿過上室的膜、到達(dá)膜的背側(cè)（少數(shù)情況下會(huì)落至下室中，如懸浮細(xì)胞的遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)），因此需要選擇較大孔徑，（如腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲實(shí)驗(yàn)常選擇8μm孔徑的產(chǎn)品）。

如何挑選小室膜的材質(zhì)？

潔特小室有聚碳酸酯（Polycarbonate, PC），聚酯（Polyesteror PolyethyleneTerephthalate，PET）兩種膜材質(zhì)。

PC和PET膜材質(zhì)應(yīng)用都很廣泛，二者的主要區(qū)別在光透性方面，即PC膜半透明，不太方便在培養(yǎng)的過程中觀察上室細(xì)胞的形態(tài)；PET膜透明，方便在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的狀態(tài)。

另外，在0.4μm孔徑下，PC膜和PET膜的孔密度（單位面積上的孔數(shù)量）不同，PC膜提供更高的膜孔密度。您可根據(jù)對(duì)實(shí)驗(yàn)的要求（是否需要觀察細(xì)胞狀態(tài)，是否需要更高孔密度的膜）來選擇。

小室的膜材質(zhì)與細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶不同，細(xì)胞貼壁情況會(huì)有什么差異嗎？

未包被的小室膜材質(zhì)（PC或PET）雖與普通塑料細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶的材質(zhì)（Polystyrene, PS）不同，但膜的兩側(cè)均經(jīng)過組織培養(yǎng)表面處理（TissueCulture Treated, TC Treated），與一般做細(xì)胞培養(yǎng)的PS耗材的表面處理相同。因此，在正常情況下，細(xì)胞在小室內(nèi)的貼壁情況應(yīng)與培養(yǎng)皿/瓶中類似。在普通培養(yǎng)時(shí)需包被基質(zhì)蛋白等輔助貼壁的細(xì)胞，在小室上仍然需要包被。包被方法類似普通培養(yǎng)表面，可通過小室膜表面積換算所需包被液的量

小室產(chǎn)品可否滅菌后重復(fù)使用？

小室產(chǎn)品為一次性使用的耗材，不可重復(fù)使用。小室的孔板和膜的材質(zhì)均無法承受高壓蒸汽滅菌，且無法確認(rèn)重復(fù)使用的小室是否被徹底清潔，因此無法保障重復(fù)使用的實(shí)驗(yàn)效果。

嵌入皿小室是否需要匹配特殊的接收板/下室產(chǎn)品?

與相應(yīng)規(guī)格的普通細(xì)胞培養(yǎng)多孔板（如TCP010006、TCP010012、TCP010024等）適配。

在接種細(xì)胞前，是否需要進(jìn)行“水化”？

大多數(shù)應(yīng)用并不需要額外進(jìn)行“水化”操作，該操作主要用于Matrigel預(yù)包被的侵襲小室，在使用前需平衡至室溫，并加入預(yù)溫至37攝氏度的無血清培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中水化兩小時(shí)。

少數(shù)情況下，提前在上下室加入培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)箱中預(yù)孵育大于1小時(shí)可幫助細(xì)胞貼壁，但大多數(shù)細(xì)胞可以直接接種。

接種細(xì)胞的加液順序如何？

一般先將預(yù)熱的培養(yǎng)基加入多孔板的孔中（下室），再輕輕將小室放入孔中。在放入時(shí)，建議將小室稍稍傾斜，一側(cè)先接觸液面，以免垂直放入在小室下生成氣泡。之后便可將混合均勻的細(xì)胞懸液加入小室內(nèi)部。

小室膜上既然有許多小孔，在包被基質(zhì)蛋白或一些單獨(dú)加液在上室的情況下，液體是否會(huì)很快漏至下室？

一般不會(huì)。小室的膜上的小孔孔徑有限，在表面張力的作用下，加入上室的包被液并不會(huì)很快漏下，如果短時(shí)間內(nèi)發(fā)現(xiàn)有液體大量滴下，需檢查小室的膜是否有裂痕或不完整的情況。

共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，上下室接種細(xì)胞的位置一般如何安排？

由于小室膜上小孔的存在，上下室的培養(yǎng)基可以交流互通，接種在上下室的細(xì)胞是相互影響的。接種細(xì)胞的位置安排需考慮收集細(xì)胞、進(jìn)行下游檢測的方便程度，同時(shí)也需要考慮到上下室培養(yǎng)面積的差異（上室的有效生長面積比下室小，相應(yīng)地，接種的細(xì)胞量恐怕有差異），您可參考相關(guān)文獻(xiàn)或進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)來最終決定實(shí)驗(yàn)安排。

小室內(nèi)接種的細(xì)胞可否消化收集？

可以的。您可采用在普通培養(yǎng)器皿中消化相應(yīng)細(xì)胞的試劑（如胰酶等），在上下室均加入推薦體積的消化液。

對(duì)小室內(nèi)接種的細(xì)胞進(jìn)行藥物處理時(shí)，藥物是僅需加入上室嗎？

由于小室膜上小孔的存在，我們建議您在上下室內(nèi)均加入含有同樣濃度藥物的培養(yǎng)基，以確保您的藥物處理濃度。